Proteklih godina Coriell je koristio sav serum inaktiviran toplinom za svoje stanične kulture kako bi inaktivirao protein komplementa koji se nalazi u serumu novorođenčeta teleta. Budući da smo prešli na fetalni goveđi serum, otkrili smo da je inaktivacija topline nije potrebna za većinu staničnih linija.
Koliko dugo zagrijavate inaktivirate FBS?
Sljedeći protokol predlaže se za toplinsku inaktivaciju fetalnog goveđeg seruma (FBS). FBS se zagrijava na 56±2°C tijekom 30±2 minute u miješanoj vodenoj kupelji. Inaktivacija topline (HI) – proces kojim se FBS održava na temperaturi od 56±2° tijekom 30±2 minute.
Zašto je toplinska inaktivacija potrebna za FBS prije upotrebe?
Uobičajeni tretman FBS-a je toplinska inaktivacija, gdje se FBS zagrijava na 56°C 30 minuta u vodenoj kupelji uz povremeno protresanje. Svrha je deaktivirati sve komponente sustava komplementa koje su prisutne u FBS [24] i druge potencijalno nepoznate inhibitore rasta stanica.
Zašto trebate zagrijavati inaktivirati serum?
Cilj inaktivacije toplinom je uništenje aktivnosti komplementa u serumu bez utjecaja na karakteristike proizvoda za poticanje rasta. Uklanjanje aktivnosti komplementa iz seruma nije potrebno za većinu staničnih kultura, ali može biti potrebno za kulture koje su osjetljive na aktivnost komplementa.
Kako pohranjujete toplinski inaktivirani FBS?
Zaštitite odmrznuti FBS i druge serume sigurnim hlađenjem iskladištenje. Odmah upotrijebite odmrznuti serum. Tekući FBS i drugi serum mogu se čuvati u hladnjaku (2 do 8 °C) do četiri tjedna.
