Budući da je stanična stijenka toliko otporna na većinu spojeva, organizmi otporni na kiselinu zahtijevaju posebnu tehniku bojenja. Primarna boja koja se koristi u bojanju otpornom na kiselinu, karbolfuksin, topiva je u lipidima i sadrži fenol, koji pomaže mrlji da prodre u staničnu stijenku. Tome dodatno pomaže dodatak topline.
Zašto je potrebna toplina za bojenje otporno na kiseline?
Zagrijavanje stakalca pomaže omekšavanju voštanog materijala na zidu bakterijske stanice. Voštani materijal je hidrofoban prema vodenoj otopini, ali ne i prema fenolnoj otopini bazičnog fuksina. Stoga jaki karbonski fuksin može obojati stanicu. Nakon bojenja, imaju tendenciju otpora na obezbojenje od 20% H2SO4 (sumporna kiselina).
Kako se lako bojite kiselinom?
Upute za brzo bojenje s kiselinama
- Sušenje na zraku i toplina fiksiraju tanak film mikroorganizama. …
- Preplavite tobogan Carbolfuchsinom. …
- Poplavite tobogan kiselim alkoholom na 30 sekundi. …
- Protubojite tobogan prelivanjem tobogana metilenskim plavim tijekom 30 sekundi. …
- Osušite slajd tako što ćete ga staviti između stranica knjige bibuloznog papira.
Da li bojanje po Gramu zahtijeva toplinu?
A bojenje po Gramu obično se izvodi na preparatu za razmaz koji je bio fiksiran toplinom. Jedna od funkcija fiksacije je pričvršćivanje (fiksiranje) stanica na stakalcu. U biofilmu, međutim, stanice su već čvrsto pričvršćene. Nadalje, fiksna toplinatobogan je suh, ali biofilm je uglavnom voda.
Koja mrlja ne zahtijeva toplinu?
Uključuje primjenu primarne boje (osnovni fuksin), sredstva za dekolorizaciju (kiselina-alkohol) i protuboja (metilensko plavo). Za razliku od Ziehl-Neelsenove boje (Z-N mrlja), Kinyoun metoda bojenja ne zahtijeva zagrijavanje.
