Podaci denzitometrije generirani za Western blotove obično se koriste za usporedbu obilja proteina između uzoraka. … Podaci nelinearne denzitometrije uočeni su kada su Western blotovi otkriveni korištenjem infracrvene fluorescencije ili kemiluminescencije, i pod različitim uvjetima SDS-PAGE.
Što je denzitometrijska analiza?
Denzitometrija je kvantitativno mjerenje optičke gustoće u materijalima osjetljivim na svjetlost, kao što su fotografski papir ili fotografski film, zbog izloženosti svjetlu.
Kako koristite denzitometriju na slici J?
Denzitometrija pomoću slikeJ
- Kliknite središte kvadrata i povucite ga na sljedeću traku. …
- Za posljednju traku, ponovite postupak ali pritisnite Ctrl i 3 za postavljanje zadnje trake. …
- Koristite alat za crtanje linija kako biste eliminirali pozadinu trake iz izračuna. …
- Idite na: Analyse→Gels→Label Peaks da biste dobili izvješće.
Kako analizirate western blot rezultate?
Provjerite svoje alate za kvantifikaciju . Na primjer, pokrenite mrlju gdje su trake napunjene s 20 µg, 15 µg i 10 µg ukupnog proteina. Nakon analize, relativna kvantitacija ciljnih pojaseva trebala bi biti 2, 1,5 i 1. Isprobajte različite alate i postavke za kvantifikaciju dok ne budete mogli pouzdano reproducirati točne rezultate.
Kako kvantificirati western blot?
Korak 1: Odredite pozadinu-oduzetugustoće vašeg proteina od interesa (PI) i normalizirajuće kontrole (NC). Korak 2: Identificirajte NC koji ima najveću vrijednost gustoće. Korak 3: Podijelite sve NC vrijednosti s najvećom vrijednošću NC gustoće da dobijete relativnu NC vrijednost.