Vrlo je važno biti svjestan da se podaci dobiveni western blotom obično smatraju polukvantitativnim. To je zato što pruža relativnu usporedbu razina proteina, ali ne i apsolutnu mjeru količine.
Je li western blot kvalitativan ili kvantitativan?
Western blot je pouzdana kvantitativna metoda samo ako se uzmu u obzir svojstva i integritet uzorka, specifičnost antitijela na ciljni protein i protokoli punjenja. Uz pažljivo obraćanje pažnje na detalje, možete izbjeći uobičajene pogreške i izbjeći pogrešno tumačenje Western blot podataka.
Koja je vrsta metode western blot?
Western blot je laboratorijska metoda koja se koristi za otkrivanje specifičnih proteinskih molekula iz mješavine proteina. Ova mješavina može uključivati sve proteine povezane s određenim tipom tkiva ili stanica.
Može li se western blot kvantificirati?
Western blotovi se detektiraju s antitijela specifičnim na ciljni protein koji su poznati kao primarna antitijela. … Međutim, također je moguće koristiti Western blotting za pružanje točne kvantifikacije proteina u uzorcima, za procjenu promjena u razinama ekspresije proteina (2).
Može li western blot kvantificirati proteine?
Nakon lize stanica, važno je odrediti ukupnu koncentraciju proteina u uzorku. Točna kvantifikacija uzorka omogućit će vam da učitateodgovarajuću količinu proteina u svakoj stazi.
