Kontrolna protutijela punjenja su važne kontrole jer ukazuju na jednako punjenje uzoraka u svim jažicama. Kontrole punjenja također pokazuju pravilan prijenos proteina na membranu tijekom western blotting procesa. Kontrole punjenja su obično proteini s visokom i sveprisutnom ekspresijom.
Što radi kontrola utovara?
Kontrola punjenja je protein koji se koristi kao kontrola u Western blotting eksperimentu. … Oni se koriste kako bi se osiguralo da je protein jednako napunjen u sve jažice.
Zašto koristimo kontrolu punjenja u Western blotu?
Kontrole učitavanja imaju drugu ulogu kontrole u western blotovima. Mogu se koristiti za provjeru da li je došlo do ravnomjernog prijenosa s gela na membranu preko cijelog gela. Ovo je imperativ kada se uspoređuju razine ekspresije proteina između uzoraka.
Kako koristite kontrolu punjenja u Western blot-u?
Signali iz kontrola učitavanja obično se koriste za normalizaciju signala iz proteina od interesa. Za korištenje kontrole punjenja u ove svrhe, detekcija s kontrolnim proteinskim protutijelom i eksperimentalnim protutijelom treba se obaviti na istom blotu. Kao kontrole punjenja koriste se različiti proteini.
Zašto se aktin koristi kao kontrola punjenja?
Beta-aktin, obično se koristi kao kontrola punjenja za Western Blot zanormalizirati otkrivene razine proteina potvrđujući da je punjenje proteina isto u cijelom gelu.
