Luciferin je uobičajeni bioluminiscentni reporter koji se koristi za in vitro snimanje ekspresije luciferaze. Ovaj vodotopivi supstrat za enzim luciferaze krijesnice (obično iz Photinus pyralis) koristi ATP i Mg2+ kao kofaktore za emitiranje karakteristične žuto-zelene emisije u prisutnosti kisika.
Što radi D-Luciferin?
Luciferin je uobičajeni bioluminiscentni reporter koji se koristi za in vivo snimanje ekspresije luciferaze . Ovaj vodotopivi supstrat za enzim luciferaze krijesnice koristi ATP i Mg2+ kao kofaktore za emitiranje karakteristične žuto-zelene emisije u prisutnosti kisika, koji prelazi u crveno svjetlo in vivo na 37°C.
Što je D-Luciferin kalij?
Detalji. Kalijeva sol D-Luciferina je koristan supstrat za enzim Luciferaza krijesnice. Nakon oksidacije enzimom luciferazom, proizvodi bioluminiscenciju. D-Luciferin se može koristiti za ispitivanje ekspresije gena luciferaze povezanog s promotorom od interesa.
Kako napraviti D-Luciferin?
1. Pripremite temeljnu otopinu luciferina 200X (30 mg/ml) u sterilnoj vodi. Lagano miješajte inverzijom dok se luciferin potpuno ne otopi. Upotrijebite odmah ili alikvot i zamrznite na -20°C za buduću upotrebu.
Kako ubrizgati luciferin?
(Luciferin se tipično primjenjuje ili intraperitonealno ili intravenozno.) Primjer: Injektirajte s 10 µLOsnovna otopina luciferina po gramu tjelesne težine (normalno ~200 µL za miša od 20 g za standardnu injekciju od 150 mg/kg). 5. Pričekajte 10-20 minuta prije snimanja za maksimalan plato signala luciferaze.
