Inkubirajte posudu na sobnoj temperaturi 2-3 minute . Čvrsto prianjajuće stanice mogu se brzo odvojiti na 37 °C. Promatrajte stanice pod mikroskopom. Odvojene stanice izgledaju zaobljene i refraktilne pod mikroskopom.
Što će se dogoditi ako predugo probate stanice?
Inkubacija stanica s previsokom koncentracijom tripsina u predugo vremenskom razdoblju oštetit će stanične membrane i ubiti stanice. Ako niste sigurni u koncentraciju tripsina za korištenje, koristite nisku koncentraciju.
Kako probati stanice?
Stanice se mogu resuspendirati nježnim pipetiranjem suspenzije stanica kako bi se razbili nakupine. Daljnje razrjeđivanje može se izvršiti, ako je potrebno, za broj stanica i/ili subkulturiranje.
Koliko je vremena potrebno da se stanice pričvrste?
prve ćelije se vežu nakon 3-5 min! Prema mom iskustvu, većina EC-ova je pričvršćena nakon 10-20 minuta. Ali što duže čekate, privrženost je čvršća.
Je li loše probati stanice dva dana zaredom?
Da, štetno je ako tripsinizirate svoje stanice kontinuirano nakon 24 sata od cijepanja. Preporučljivo je napraviti cijepanje nakon 48 sati cijepanja. … Možete održavati stanice dok morfologija nije dobra (Ovisi o vrsti vaše stanice, neke stanice mogu imati do 80 prolaza, a neke do 10).
