Što je veća molekularna težina, to je zavojnica duža i molekula ide sporije. Dakle, elektroforeza + SDS razdvaja se na temelju molekularne težine, a ne na temelju prirodnog naboja. Važna napomena: Proteini iste dužine obično se ne mogu razdvojiti gel elektroforezom + SDS.
Kako odvojiti proteine iste molekularne težine?
Centrifugiranje, elektroforeza i kromatografija najčešće su tehnike za pročišćavanje i analizu proteina. Centrifugiranjem se proteini odvajaju na temelju njihove stope sedimentacije, na koju utječu njihova masa i oblik.
Koje tehnike razdvajaju proteine na temelju naboja?
Proteini se mogu odvojiti na temelju njihovog neto naboja kromatografijom ionske izmjene. Ako protein ima neto pozitivan naboj pri pH 7, obično će se vezati na stupac kuglica koje sadrže karboksilatne skupine, dok negativno nabijeni protein neće (slika 4.4).
Koja je od sljedećih tehnika najprikladnija za odvajanje proteina na temelju molekularne težine?
Metode kromatografije temeljene na particiji vrlo su učinkovite u odvajanju i identifikaciji malih molekula kao što su aminokiseline, ugljikohidrati i masne kiseline. Međutim, afinitetne kromatografije (tj. kromatografija s ionskom izmjenom) učinkovitije su u odvajanju makromolekula kao nukleinskih kiselina i proteina.
Koja vrsta stupcakromatografija razdvaja proteine na temelju molekularne težine?
Gel filtracijska (GF) kromatografija razdvaja proteine isključivo na temelju molekularne veličine. Odvajanje se postiže korištenjem porozne matrice kojoj molekule, iz steričnih razloga, imaju različite stupnjeve pristupa – tj. manje molekule imaju veći pristup, a veće molekule su isključene iz matrice.
