Međutim, kada se spektri emisije preklapaju, može se detektirati fluorescencija iz više od jednog fluorokroma. Za korekciju ovog spektralnog preklapanja koristi se proces kompenzacije fluorescencije. To osigurava da fluorescencija otkrivena u određenom detektoru potječe od fluorokroma koji se mjeri.
Zašto nam je potrebna kompenzacija u protočnoj citometriji?
Kompenzacija je potrebna za eksperiment protočne citometrije zbog fizike fluorescencije. Fluorokrom se pobuđuje i emitira foton u rasponu valnih duljina. Neki od tih fotona se izlijevaju u drugi detektor, uzrokujući da pojedinačni obojeni uzorci izgledaju dvostruko pozitivni.
Koja je glavna svrha korištenja kompenzacijske ćelije?
Primarna svrha je omogućiti mjerenje prave fluorescencije u primarnom kanalu kontaminiranom preljevom iz susjednih fluorofora. Prema tome, kompenzacija ispravlja fluorescencijski "prestup" između fluorofora. Međutim, nije savršen i ne može popraviti sve neželjene učinke.
Što je matrica kompenzacije?
Matrica kompenzacije izračunava se korištenjem jednobojnih fluorescentnih kontrolnih datoteka koje se prikupljaju na ImageStream ili FlowSight sa svim prikupljenim kanalima i u nedostatku osvjetljenja svijetlog polja ili SSC.
Što je spektralna kompenzacija?
Upotreba spektrakompenzacija znači da se signal iz neprimarnih detektora još uvijek koristi za poboljšanje pravog signala markera gdje je to moguće. Primarni kontrolni uzorci koriste se za imenovanje parametara. … Uzorci koji se koriste za primarne detektore također pomažu da se ti parametri imenuju nakon spektralne kompenzacije.
